Ses missions
Le plateau PCANS (Plateau de Chromatographie et d’ANalyses de Sucres) est dédié à la caractérisation, à l’analyse structurale et à la purification des glycanes. Il constitue un support technique et méthodologique aux 5 équipes de recherche du CERMAV. Il peut également être sollicité dans le cadre de prestations de service (sous forme de prestations ponctuelles ou de contrats de prestations) ou de collaboration de recherche, par des industriels, des laboratoires de recherches publiques (CNRS, Universités, INRAE, INSERM, …) ou d’autres entités nécessitant l’expertise de celui-ci (Hôpitaux, laboratoires privés …).
Exemples d’analyses proposées dans le cadre des prestations
- Dosage colorimétrique des sucres totaux (méthode de Dubois)
- Dosage colorimétrique des protéines (méthode de Bradford)
- Dosage colorimétrique des sulfates (méthode à l’Azure A)
- Analyse qualitative et quantitative des monosaccharides par chromatographie ionique couplée à un détecteur par ampérométrie pulsée (HPAEC/PAD), ou par chromatographie liquide haute performance couplée à un réfractomètre (HPLC/RI)
- Analyse qualitative et quantitative des monosaccharides constitutifs des oligo et polysaccharides, après dérivation chimique, par chromatographie en phase gazeuse (GC/FID)
- Détermination des liaisons osidiques des oligo et polysaccharides, après dérivation chimique, par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC/MS)
- Détermination des poids moléculaires et de l’indice de polydispersité par chromatographie d’exclusion stérique couplée à une triple détection, UV-Visible, diffusion de lumière multiangles et réfractométrie (HPSEC/UV-MALS-RI)
- Séparation de composés par chromatographie liquide haute performance couplée à différents détecteurs, réfractométrie, UV-Visible ou détecteur évaporatif à diffusion de lumière (RI-UV ou DEDL)
- Fractionnement et purification de composés par chromatographie d’exclusion stérique couplée à un réfractomètre (SEC/RI)
- Dessalage et/ou Ultrafiltration d’oligo et polysaccharides
Personnels du plateau
Le plateau regroupe l’expertise scientifique et technique de trois personnes :
Laurine BUON
Ingénieure d’Etude et Responsable du plateau, spécialisée dans l’analyse structurale et la purification de mono-oligo et polysaccharides par différentes méthodes de chromatographie en phase liquide, ionique et gazeuse ;
Eric BAYMA,
Assistant Ingénieur, spécialiste en analyses de poids moléculaires par chromatographie liquide HPSEC/UV-MALS-RI, et responsable de la maintenance des équipements ;
Clara BILLET,
Assistant Ingénieur, spécialisé en analyse de composition osidique par chromatographie en phase gazeuse et par chromatographie ionique,
Ses équipements
Pour mener à bien ses missions, le plateau dispose d’un panel d’équipements de chromatographies en phase liquide et gazeuse.
Chromatographie en phase liquide (10 équipements ):
3 Chromatographes liquides ultra hautes pressions (Ultimate 3000 -ThermoFisher),couplés à différents types de détecteurs (UV/Visible, Réfractomètre, Détecteur évaporatif à diffusion de lumière) et équipés de différents types de colonnes analytiques ou semi-preparatives, en phase normales, inverses, greffées et gels filtration.
2 Chromatographes ioniques (Dionex ICS3000 et ICS6000 – ThermoFisher), couplés à un détecteur ampérométrique pulsé (HPAEC-PAD) ou électrochimique (HPAEC-EC), et équipés de différents types de colonnes analytiques (CarboPac et IonPac).
1 Chromatographe liquide d’exclusion stérique (HPSEC – Shimadzu), couplés à trois détecteurs (UV, Détecteur à diffusion de lumière 3 angles MiniDawn Treos et Réfractomètre Optilab), et équipé de différentes colonnes analytiques gel filtration (TSK gel et Shodex OH Pak).
4 Systèmes de chromatographie à basses pression dédiés à la purification, couplés à un réfractomètre et équipés de différents types de colonnes gel filtration (gel HW40, Biogel, Superdex, Sephadex)
Chromatographie en phase gazeuse (2 équipements):
2 Chromatographes en phase gazeuse (GC6850 – Agilent),couplés à un détecteur à ionisation de flamme (GC-FID) ou à un spectromètre de masse simple quadripôle (GC-MS)
Modalités d’utilisation et conditions d’accès au plateau
Le plateau est ouvert à la communauté scientifique publique et privée, dans la limite de son expertise, de ses champs d’application et de ses ressources humaines et techniques. Les services proposés sont détaillés dans le paragraphe « Type d’analyses proposées dans le cadre des prestations »
Les demandes ou interactions, peuvent être réalisées sous forme de prestations ponctuelles, de contrat de prestation de service ou de collaborations de recherche, selon le contexte et les objectifs.
Mode de fonctionnement
Toute demande fait l’objet d’un échange préalable avec les membres du plateau, soit par téléphone soit par mail. En fonction de la complexité de la demande, une réunion peut être envisagée.
Un exemple de processus du traitement des demandes est proposé dans le schéma ci-dessous :
Publications
Contacts
Plateau de Chromatographie et d’ANalyses de Sucres PCANS :
- chromatographie@cermav.cnrs.fr
- 06.12.85.47.94 et 04.76.03.76.70
-
CERMAV-CNRS
Plateau PCANS – Mme Laurine BUON ou Mr Eric BAYMA
601 Rue de la chimie – Domaine Universitaire de Saint Martin D’Hères
38610 GIERES
Mots clés : Monosaccharides, Oligosaccharides, Polysaccharides, Chromatographie, Analyses structurales, Purification de glycanes, Dérivation
